專利名稱：商陸皂苷甲在制備預防或治療肺纖維化藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，具體涉及一種從傳統中藥商陸中分離到的三 萜皂苷一商陸皂苷甲在制備預防或治療肺纖維化藥物中的應用。
背景技術：
傳統中藥商陸(P/^to/MM"c/"M)應用歷史悠久，為歷屆中國藥典收錄 品種。商陸性苦、寒，歸肺、脾、腎、大腸經。中醫(yī)認為具有逐水消腫、解 毒散結之功效。多年來，發(fā)明人應用現代技術與方法對商陸皂苷進行了系統
的化學成分研究，分離鑒定了所含的30多種皂苷成分，其中18種為新化合
我們的研究發(fā)現，商陸皂苷主要有效成分是商陸皂苷甲，商陸皂苷甲 (Esculentoside A ， EsA)是一個良好的COX-II抑制劑，具有良好的抑制炎 癥反應的作用(Fei Wu, Yanghua Yi, Peng Sun, Dazhi Zhang, Synthesis, in vitro inhibitory activity towards COX-2and haemolytic activity of derivatives of Esculentoside A. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2007, 17, 6430.)。商 陸皂苷甲抗炎作用主要是通過抑制巨噬細胞釋放血小板激活因子(PAF)、 IL-lou IL-lp、 TNF和PGE2等多種炎癥介質釋放而產生的，具有不同于傳統 抗炎藥物的機制(方軍，商陸皂苷甲抑制大鼠腹腔巨噬細胞釋放血小板活化 因子，第二軍度丈學,叛1990， (5)， 409。鄭欽岳，方軍，王洪斌，商陸皂甙 甲對人外周血單核細胞產生腫瘤壞死因子的抑制作用，^^"二^"^X:學學/^ 1997， 18(5) ， 415。鄭向民，鄭欽岳，王元和，商陸皂苷甲對人體淋巴細胞 TNF表達的影響，^房^"潘學會疆諷1998， 15(4)， 21 。 Xiao Z., Sun Y.， Yang S.， Yin L.， Wang W., Yi Y., Fenton B. M.， Zhang L., Okunieff P. Protective effect of esculentoside A on radiation-induced dermatitis and fibrosis. /wtewaZ/owa/ Jowr"o/i fl(iz'加'w7 Owco/ogy祝o/ogy戶/z，'c51 2006， 65, 882)。
肺纖維化是一種以彌漫性肺泡炎和肺泡結構紊亂并最終導致肺間質纖 維化為特征的疾病。多種肺疾病包括各種致病原感染、過敏性肺炎、急性呼 吸窘迫綜合征、間質性肺炎、慢性阻塞性肺炎、腫瘤以及藥物副作用(腫瘤放療和化療、濫用大劑量糖皮質激素等)都會引起不同程度的肺纖維化。肺 纖維化的發(fā)生和發(fā)展機制至今尚不完全清楚，目前認為至少涉及內皮和上皮
細胞損傷、TH1/TH2/Treg免疫失衡、成纖維細胞增殖、成肌纖維細胞分化、 細胞外基質調節(jié)失衡、氧化應激以及凋亡等多種不同分子機制。
肺纖維化發(fā)病機理不明、診斷治療困難、死亡率高，相應的藥物研究一 直是近年來醫(yī)藥研究領域的熱點和難點。由于肺纖維化發(fā)病原因復雜多樣， 導致其藥物治療出現了對應多靶點、多通道的多元性藥物研發(fā)，包括作用于 肺泡上皮細胞的藥物、作用于成纖和成肌纖維細胞的藥物、抗氧化藥物、抑 制新生血管藥物、抗細胞因子抗體及抑制劑等(崔冰，胡卓偉?？狗卫w維化 藥物治療研究進展。主:^矜學遂展2008， 39 (3) ， 233)。
中藥及天然產物可多通道、多靶點治療肺纖維化，具有毒性低、副作用 少等優(yōu)點，是開發(fā)抗纖維化藥物的巨大資源庫。除了已經用于治療肺纖維化 的秋水仙堿外，目前已經在多種肺纖維化的動物模型上證明有效的藥物還包 括丹參、當歸、漢防己甲素、川芎嗪、雷公藤、銀杏葉制劑、刺五加、槲皮 素、己酮可可堿、三七總苷等(崔冰，胡卓偉?？狗卫w維化藥物治療研究進 展。全潘辟#^展2008， 39 (3) ， 233)。目前，尚無有關商陸皂苷甲在 預防或治療肺纖維化藥物中應用的報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供商陸皂苷甲在制備預防或治療肺纖維化藥物中的應用。
商陸皂苷甲(Esculentoside A， EsA， 3-0-[^-D-吡喃葡萄糖-(l,4)-^-D-吡. 喃木糖淨羥基商陸酸-29-甲酯,3-0-[A-D-glucopyranosyl-(l，4)-/ 畫D-xylopyranosyl] phytolaccagenin)由傳統中藥商陸分離純化得到，經1D、 2D NMR， IR， ESIMS，["]等波譜手段確定其分子式為(3421166016，白色結晶 性粉末，m.p.251 251.5。C, [a]D18 = 57.1° (c = 0.4，甲醇)，具有如下分子結構商陸皂苷甲(EsculentosideA)
商陸皂苷甲經藥理實驗證明，無論低劑量(7.5 mg/kg)還是高低劑量(15 mg/kg)，無論造模同時給藥還是7天后開始給藥，都能夠顯著對抗肺組織纖維 化形成，可用于相關疾病的預防和治療，具有良好的應用前景。


圖1是博萊霉素造模4周時的大鼠肺臟照片
其中A空白對照組；B模型組；C EsA低劑組；D EsA高劑組；
E EsA 7天給藥組 圖2是博萊霉素造模4周時的大鼠肺組織切片(400倍)
其中A空白對照組；B模型組；CEsA低劑組；D EsA高劑組
具體實施例方式
下面結合附圖及實施例對本發(fā)明進行詳細描述。
實施例l:商陸皂苷甲對肺纖維化的治療作用
動物雄性SD大鼠50只，體重230-250 g， 8周齡，購自上海市中國科 學院實驗動物中心(SPF級)。
試劑注射用鹽酸博萊霉素,規(guī)格15mg(生產商日本化藥株式會社)。 藥物商陸皂苷甲(分離提純方法見易揚華，王著錄。商陸有效成分
的研究II三萜皂苷的分離與鑒定。第二軍度乂學學叛1984，增刊，71) 造模大鼠稱重后，10%水合氯醛麻醉，按3.5mg/kg氣管直接注射法給
予博萊霉素造模。肺組織的病理學檢査分離肺臟，注入10%福爾馬林液固定1周，切片，
行Masson染色，光鏡下觀察肺組織炎癥及纖維化情況。
方法將大鼠隨機分成5組空白對照組(給予生理鹽水)，博萊霉素
模型組，EsA低劑量組，EsA高劑量組，EsA7天給藥組?？瞻讓φ战M及博萊 霉素模型組每天灌胃生理鹽水lmL，造模當天開始給藥；EsA低劑量組按7.5 mg/kg， EsA高劑量組按15mg/kg，每天灌胃一次，造模當天開始給藥，直到 造模后4周實驗結束。EsA7天給藥組按30 mg/kg，每天灌胃一次，造模后第 7天開始給藥，直到造模后4周實驗結束。
造模28天后，10%水合氯醛麻醉各組動物，分離肺臟，肉眼觀察各組肺 纖維化的程度，并作組織切片對其纖維化程度作進一步比對。
肉眼觀察到A空白對照組觀察到表面光潔的正常肺組織；B模型組雙 測肺組織表面多斑痕、大面積纖維化；C EsA低劑組可見雙測肺葉均有部分 纖維化組織形成，但程度較模型組顯著降低；D EsA高劑組更加接近正常肺 組織，散見有纖維化組織。EEsA7天給藥組部分肺臟形成纖維化組織，但其 纖維化程度顯著低于模型組，可見，高劑量組和低劑量組商陸皂苷甲對博萊 霉素導致的大鼠肺纖維化均具有顯著的抑制作用，高劑量組效果優(yōu)于低劑量 組，這種差異僅憑肉眼就能觀察到。更重要的是，實驗證實EsA7天給藥組 商陸皂苷甲對博萊霉素導致的大鼠肺纖維化同樣顯示顯著的抑制作用，這種 差異僅憑肉眼就能觀察到(見圖l)。
光鏡觀察相應的組織切片，A空白對照組正常肺組織；B模型組膠原染色 區(qū)域(藍染區(qū)為膠原纖維著色部位)增加，部分肺泡腔消失，或被淋巴細胞、 成纖維細胞團和膠原纖維填塞；CEsA低劑組肺纖維化病變程度明顯減輕；D EsA高劑組膠原纖維增生進一步降低，進一步證實了商陸皂苷甲對肺纖維化 的治療作用(見圖2)。
實驗表明，商陸皂苷甲體內能夠顯著對抗肺組織纖維化的形成，對肺纖維 化有良好的預防或治療效果，具有良好的藥物應用前景。
權利要求
1、商陸皂苷甲在制備預防或治療肺纖維化藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，傳統中藥商陸(Phytolacca acinsa)應用歷史悠久，商陸皂苷主要有效成分是商陸皂苷甲(Esculentoside A，EsA)是一個良好的COX-II抑制劑，具有良好的抑制炎癥反應的作用。本發(fā)明的目的是提供商陸皂苷甲在制備預防或治療肺纖維化藥物中的新用途。本發(fā)明經藥理實驗證明，商陸皂苷甲能夠顯著對抗肺組織纖維化形成，可用于相關疾病的預防和治療，具有良好的藥物應用前景。
文檔編號A61P11/00GK101502528SQ20091004798
公開日2009年8月12日 申請日期2009年3月23日 優(yōu)先權日2009年3月23日
發(fā)明者劉寶姝, 文 張, 易楊華, 玲 李, 華 湯 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學